Источник публикации
"Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Часть XI". М., 1981
Примечание к документу
Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
Название документа
"Методические указания по определению тачигарена в воде методом тонкослойной хроматографии"
(утв. Минздравом СССР 19.10.1979 N 2094-79)

Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
19 октября 1979 г. N 2094-79

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТАЧИГАРЕНА В ВОДЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания тачигарена в воде при санитарном контроле.
1. Краткая характеристика препарата

        H┌┬───┬┐OH
         ││   ││
       H C\   /N                                  Молекулярная масса 99,03.
        3  \ /                                    C H O N.
            О                                      4 5 2

Действующее начало препарата тачигарен (Ф-319) - 3-окси-5-метил-изоксазол. Чистое вещество - бесцветные игольчатые кристаллы с температурой плавления 86 - 87 °С, стабильное к действию кислот и щелочей. Растворимость в воде при 25 °С: 85 г в 100 мл. Хорошо растворим в метаноле, этаноле, ацетоне. Препарат рекомендуется для протравливания семян сахарной свеклы. Применяется в виде 70-процентного смачивающего порошка. ПДК тачигарена в воде в настоящее время не установлена.
2. Методика определения тачигарена в воде
2.1. Принцип метода. Метод основан на экстракции тачигарена из воды органическим растворителем с последующим определением с помощью тонкослойной хроматографии. Минимально открываемое количество тачигарена на тонкослойных хроматограммах 5 мкг.
2.2. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице.

Таблица

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТАЧИГАРЕНА
В ВОДЕ С ПОМОЩЬЮ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Диапазон определяемых концентраций 0,1 - 1,0 мг/л

Анали-  
зируемая
проба   	Предел   
обнаруже-
ния, мг/л	   Число    
параллельных
определений 	Размах  
варьиро-
вания, %	Среднее   
значение  
определе- 
ния, %    	Стандарт-
ное от-  
клонение,
%        	Относитель-
ное стан-  
дартное от-
клонение, %	
Вода    	0,1      	5           	20,0    	84,6      	7,17     	8,47       	

2.3. Реактивы и растворы

КонсультантПлюс: примечание.
Взамен ГОСТ 2603-71 Постановлением Госстандарта СССР от 17.04.1979 N 1404 с 1 июля 1980 года введен в действие ГОСТ 2603-79.	
Ацетон, хч, ГОСТ 2603-71.
Эфир для наркоза, Фармакопея СССР (перегнанный).
н-Гексан, ч, МРТУ 6-09-2937-66 (перегнанный).

КонсультантПлюс: примечание.
Взамен ГОСТ 5955-68 Постановлением Госстандарта СССР от 12.02.1975 N 408 с 1 марта 1975 года введен в действие ГОСТ 5955-75.	
Бензол, хч, ГОСТ 5955-68.

КонсультантПлюс: примечание.
Взамен ГОСТ 4166-66 Постановлением Госстандарта СССР от 26.10.1976 N 2395 с 1 января 1978 года введен в действие ГОСТ 4166-76.	
Натрий сернокислый безводный, ч, ГОСТ 4166-66.

КонсультантПлюс: примечание.
Взамен ГОСТ 4233-66 Постановлением Госстандарта СССР от 08.04.1977 N 882 с 1 января 1978 года введен в действие ГОСТ 4233-77.	
Натрий хлористый, хч, ГОСТ 4233-66.

КонсультантПлюс: примечание.
Взамен ГОСТ 10163-62 Постановлением Госстандарта СССР от 17.02.1976 N 420 с 1 января 1977 года введен в действие ГОСТ 10163-76.	
Крахмал картофельный растворимый для йодометрии, ГОСТ 10163-62.
Стандартный раствор тачигарена в н-гексане с содержанием 0,5 мг/мл. Помещают 50 мг тачигарена в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки н-гексаном.

КонсультантПлюс: примечание.
Взамен ГОСТ 1277-63 Постановлением Госстандарта СССР от 22.01.1975 N 128 с 1 января 1976 года введен в действие ГОСТ 1277-75.	
Азотнокислое серебро, чда, ГОСТ 1277-63.
Бромфеноловый синий, чда, ТУ МГ УХП 271-59.
Проявляющий реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 0,05 г бромфенолового синего, 10 мл ацетона и доводят до метки 0,5-процентным водно-ацетоновым раствором азотнокислого серебра (0,5 г азотнокислого серебра растворяют в смеси 24 мл ацетона и 76 мл дистиллированной воды).
Силикагель КСК, N 2, ГОСТ 3956-76, ТУ 6-09-2523-72. Для приготовления сорбционной массы для хроматографических пластинок 1 г крахмала заваривают в 15 мл дистиллированной воды, прибавляют еще 110 мл воды, 40 г силикагеля, измельченного и просеянного через сито 100/120 меш, и тщательно перемешивают. Это количество сорбционной массы равномерно наносят на 15 пластинок. Пластинки сушат на воздухе и хранят в эксикаторе.
2.4. Приборы и посуда
Делительные воронки на 1 л, ГОСТ 8613-75.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Мерные колбы на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

КонсультантПлюс: примечание.
Взамен ГОСТ 10394-72 Постановлением Госстандарта СССР от 15.07.1982 N 2670 с 1 января 1984 года введен в действие ГОСТ 25336-82.	
Грушевидные колбы на 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Водяная баня, ТУ 46-22-603-75.
Вакуумный водоструйный стеклянный насос, ГОСТ 10696-75.
Стеклянный лабораторный холодильник, ХПТ, ГОСТ 9499-70.
Камера хроматографическая, 150 х 200, 105 х 165 мм, ГОСТ 10565-63.
Эксикатор, ГОСТ 6371-73.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74.
Медицинский шприц на 1 мл.
Стеклянные пластинки, 9 x 12 см.
Сито капроновое, 100/120 меш.
Пульверизатор стеклянный для обработки пластинок.
Электроплитка, ТУ 92-275-76.
Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76Е.
Камера для обработки пластинок, ТУ 25-11-430-70.
2.5. Проведение определения
    Пробу  воды  (250  -  750 мл) помещают в делительную воронку, добавляют
хлористый  натрий  из расчета 3,3 г на 10 мл воды, энергично встряхивают до
полного  растворения  соли и экстрагируют тачигарен диэтиловым эфиром (100,
50 и 50 мл). В случае объема пробы воды 250 мл объем экстрагента может быть
уменьшен  (50, 25 и 25 мл). Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом
натрия  (5 - 10 г) в течение 15 - 30 минут при периодическом встряхивании и
упаривают  растворитель на ротационном испарителе (температура водяной бани
не  выше  30  °С)  до  небольшого  объема  (~  1  мл).  Упаренный  экстракт
количественно  наносят  на  хроматографическую  пластинку  с  тонким  слоем
силикагеля  КСК, скрепленного крахмалом, с помощью медицинского шприца на 1
мл.  Слева  и  справа  от пробы наносят по два пятна (5 и 10 мкг) стандарта
тачигарена  в  виде  раствора  в н-гексане и проводят хроматографирование в
системе  растворителей  бензол  -  ацетон  (3:1).  Для  хроматографирования
используют  насыщенную  камеру.  Для  насыщения  стенки  камеры обкладывают
фильтровальной    бумагой,   которая   касается   смеси   растворителей   и
пропитывается.  Через  два  часа  быстро открывают крышку камеры и помещают
пластинку    для   развития   хроматограммы.   После   окончания   процесса
хроматографирования  (подъем  фронта  растворителя  на  11,5  см) пластинку
извлекают из камеры, сушат на  воздухе  в  вытяжном  шкафу  и  обрабатывают
проявляющим  реактивом.   При  наличии  в  пробе  тачигарена  на  пластинке
появляется светло-желтое пятно на  синем  фоне  с  величиной  R  = 0,88 +/-
                                                               f
0,02.  Оценку  качества  тачигарена   на   хроматограмме   проводят   путем
визуального сравнения размера и интенсивности  окраски  пятен  стандарта  с
пятном пробы.
2.6. Обработка результатов анализа
Для определения содержания тачигарена в воде используют следующую формулу:

                                     5
                                   10  x А
                               Д = -------,
                                    а x R

где:
Д - содержание тачигарена в воде, мг/л;
А - количество тачигарена в пробе, найденное визуальным сравнением со стандартным пятном, мг;
а - объем пробы, мл;
R - процент определения, найденный предварительно, %.
3. Настоящие Методические указания разработаны В.Д. Чмилем, Е.В. Безкровной и А.С. Меженной (ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев).
4. Требования безопасности
Соблюдаются требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами.