"Методические указания по определению трифорина в воде"
(утв. Минздравом СССР 28.01.1980 N 2140-80)	
Документ предоставлен КонсультантПлюс

www.consultant.ru

Дата сохранения: 04.09.2018

Источник публикации
"Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Часть XI". М., 1981
Примечание к документу
Документ включен в Перечень нормативной документации, разрешенной для использования в государственных ветеринарных лабораториях при диагностике болезней животных, рыб, пчел, а также контроля безопасности сырья животного и растительного происхождения (утв. Россельхознадзором 30.07.2009 N 02-03-48/563).
Название документа
"Методические указания по определению трифорина в воде"
(утв. Минздравом СССР 28.01.1980 N 2140-80)

Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
28 января 1980 г. N 2140-80

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИФОРИНА В ВОДЕ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Характеристика анализируемого пестицида

    Активное вещество -
          1            1  1  1              1
1,4-бис-(1 -формамидо-2 ,2 ,2 -трихлорэтил-1 )-пиперазин.

    Структурная формула:                           Эмпирическая формула:

    Cl C-CH-NH-CHO                                 C  H  Cl N O
      3  │                                          10 14  6 4 2
         N
        / \
       │   │
        \ /
         N
         │
    Cl C-CH-NH-CHO
      3

Торговое наименование saprol, фунгинекс, трифорин 20.
Молекулярная масса трифорина 434,96.
Трифорин - белое кристаллическое вещество без запаха. Темп. пл. 156 - 158 °С (с разложением). Растворимость при комнатной температуре в воде 27 - 29 мг/л.
    Хорошо    растворяется    в    диметилформамиде,    диметилсульфоксиде,
тетрагидрофуране.  Растворяется  в  ацетоне,  бензоле, хлороформе. Давление
              -7
пара  2  х  10    мм  рт.  ст.  при 20 °С. Выпускается в виде эмульсионного
концентрата  трифорина.  Токсичность  ЛД    для  крыс  и  мышей 6000 мг/кг.
                                        50
Трифорин  обладает  защитным,  куративным, до некоторой степени системным и
акарицидным  действием. Препарат предназначен для борьбы с мучнистой росой,
паршей,  ржавчиной,  монилиозами  и  болезнями  листьев злаковых, плодовых,
овощных  и  декоративных  культур.  Можно  применять  на  яблоне  (парша  и
мучнистая  роса),  на  винограде  (сидиум  и  серная  гниль)  и  на огурцах
(мучнистая роса).

2. Методика определения трифорина в воде
методом тонкослойной хроматографии

2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на экстракции пестицида из анализируемой пробы хлороформом, очистке экстракта и хроматографировании на пластинках "Силуфол" или в тонком слое силикагеля.
Подвижными фазами служат смеси: н-гексан и ацетон (10:7) или н-гептан и ацетон (1:2).
Проявление хроматограмм осуществляется двумя способами.
I способ. Раствором азотнокислого серебра и аммиака в ацетоне с последующим ультрафиолетовым облучением.
II способ. 5-процентным раствором фосфорномолибденовой кислоты с последующим 5-минутным нагревом при 80 - 90 °С и ультрафиолетовым облучением.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Диапазон определяемых концентраций - 0,1 - 10 мкг.
Нижний предел обнаружения трифорина (см. таблицу):

┌─────────────────────────┬───────────────────┬───────────────────┐
│                         │     "Силуфол"     │     Силикагель    │
│                         ├───────────────────┼───────────────────┤
│                         │Проявляющий реактив│Проявляющий реактив│
│                         ├───────┬───────────┼───────┬───────────┤
│                         │ AgNO  │Фосфорномо-│ AgNO  │Фосфорномо-│
│                         │     3 │либденовая │     3 │либденовая │
│                         │       │кислота    │       │кислота    │
├─────────────────────────┼───────┼───────────┼───────┼───────────┤
│Из стандартного раствора,│0,1    │2 - 3      │0,2    │3          │
│трифорин, мкг            │       │           │       │           │
│Нижний предел обнаружения│0,4    │3 - 4      │0,5    │5 - 6      │
│трифорина в воде, мкг, в │       │           │       │           │
│анализируемом объеме воды│       │           │       │           │
└─────────────────────────┴───────┴───────────┴───────┴───────────┘

Размах варьирования R = 95 - 80 = 15%.
Среднее значение определения стандартных количеств пестицидов - 88%.
Стандартное отклонение - 2,5%.
Относительное стандартное отклонение - 0,03.
Доверительный интервал среднего при р = 0,95 и n = 5 альфа = 88 +/- 3%.
Определению не мешают пестициды кельтан, хлорофос, оксихлорид меди, которые применяются для обработки тех же культур.
2.2. Реактивы и растворы
Азотнокислое серебро.
Аммиак, 25-процентный.
Ацетон, х.ч.
н-Гексан, х.ч.
н-Гептан, х.ч.
Натрий сернокислый безводный.
Пластинки "Силуфол".
    Силикагель Л, ЛСД    5/40 мю.
                     254
Смесь растворителей N 1. Н-гексан и ацетон = 10:7.
Смесь растворителей N 2. Н-гептан и ацетон = 1:2.
Спирт этиловый.
Стандартный раствор трифорина. Растворяют 0,025 г препарата (х.ч.) в 50 мл этилового спирта. Концентрация препарата 500 мкг/мл.
Фосфорномолибденовая кислота, 5-процентный раствор в этиловом спирте.
Хлороформ, х.ч.
2.3. Посуда и приборы
Воронки химические.
Камера для опрыскивания пластин.
Камера для хроматографирования.
Колбы конические 100, 150 мл.
Грушевидные колбы для отгонки растворителя.
Лампа ультрафиолетовая марки ОКН-11.
Капилляры для нанесения проб.
Микрошприцы на 1 и 10 микролитров.
Пластинки стеклянные размером 90 х 120 мм со слоем силикагеля (используются в случае отсутствия пластинок "Силуфол").
Прибор для отгонки растворителя.
Пульверизатор стеклянный.
Шкаф сушильный.
Цилиндры мерные на 50, 100 мл.
2.4. Подготовка к определению. Приготовление пластинок
Стеклянные пластинки размером 90 х 120 мл тщательно моют раствором хромовой смеси, промывают проточной водой, затем дистиллированной и сушат.
    Взвешивают 14 г силикагеля и 1 г гипса. В фарфоровой ступке растирают с
40  мл  дистиллированной  воды.  Наносят на пластинки одинаковое количество
массы  и оставляют сохнуть до следующего дня на воздухе. Хранят пластинки в
эксикаторе  над  CaCl .  Активирование  пластинки  проводят  нагреванием  в
                     2
сушильном шкафу при 130 - 140 °С в течение 30 мин. непосредственно перед их
использованием.
2.5. Проведение определения
2.5.1. Экстракция
К 100 мл анализируемой воды в делительной воронке прибавляют 50 мл хлороформа и встряхивают 5 мин. Экстракцию хлороформом повторяют. Хлороформный слой два раза профильтровывают через воронку, заполненную 4 - 5 г безводного сернокислого натрия. Фильтрат упаривают до 0,1 мл.
2.5.2. Хроматографирование
Экстракт с помощью капилляра наносят на пластинку для хроматографирования. Колбу промывают 0,1 мл хлороформа 4 - 5 раз и наносят на пластинку. Рядом с пробой наносят стандартный раствор микрошприцем в количестве 0,1 - 10 мкг.
    Пластинку опускают в камеру для хроматографирования. Когда растворитель
(н-гексан  и  ацетон = 10:7 или н-гептан и ацетон = 1:2) поднимется на 10 -
11  см,  пластинку вынимают и выдерживают при комнатной температуре 30 - 45
мин.,  чтобы  полностью  улетучился  растворитель,  и проявляют. Проявляя с
азотнокислым   серебром,   пластинку   после  опрыскивания  высушивают  при
комнатной  температуре  и  облучают  ультрафиолетовым  светом  5  -  7 мин.
Проявляя  с  фосфорномолибденовой  кислотой,  пластинки  после опрыскивания
высушивают  при комнатной температуре, выдерживают в сушильном шкафу 5 мин.
при  80  -  90 °С и облучают ультрафиолетовым светом 5 - 7 мин. При наличии
трифорина  в  анализируемой  пробе  воды  появляется пятно черного цвета на
светлом   фоне   (азотнокислое  серебро)  и  желтое  пятно  на  синем  фоне
(фосфорномолибденовая   кислота).   Величины  R   в  системе  растворителей
                                               f
н-гексан  и  ацетон  = 10:7 - 0,38 - 0,39, н-гептан и ацетон = 1:2 - 0,70 -
0,72.  Сравнивают  размер  и интенсивность пятен проб с пятном стандартного
раствора.
2.6. Обработка результатов анализа
Количественное определение производится путем сравнения площади пятен проб и стандартных растворов. Измерение площадей осуществляется с помощью стекла, на котором нанесена миллиметровочная сетка. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается до 10 мкг. При больших содержаниях препарата на пластинку наносят часть экстракта.
Содержание препарата в анализируемой пробе в мг/л (Х) рассчитывается по формуле:

                                    А х S
                                         2
                                Х = ------,
                                    Р х S
                                         1

    где:
    А - количество стандартного раствора, мкг;
    S  - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
     1
    S  - площадь пятна пробы, кв. мм;
     2
    Р - количество пробы, взятой для анализа, мл.
2.7. Требования безопасности
Соблюдать требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, УФ-светом.
2.8. Методические указания подготовлены НИИ эпидемиологии, микробиологии и гигиены Минздрава Лит. ССР (к.х.н. Юргайтене П.Ю.) и ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс (д.б.н., проф. Клисенко М.А., к.х.н. Киселевой Н.И.).